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關于SDS-PAGE凝膠電泳的常見問答

電泳是分離蛋白質和其他物質如核酸、嘌呤、嘧啶、一些有機化合物甚至無機離子的主要技術。目前的大部分電泳是將樣品分離到固定介質中的流動相中。聚丙烯酰胺凝膠是主要介質之一。它是一種多孔凝膠，其孔徑接近蛋白質分子的大小，提高了蛋白質的分辨率。此外，聚丙烯酰胺凝膠化學穩(wěn)定性好，重復性強，對pH和溫度變化穩(wěn)定，顏色觀察容易。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）在蛋白質分子量測定、特異性蛋白質檢測、菌種鑒定等方面具有操作簡單、重現(xiàn)性好等特點，因此廣為使用。電泳SDS-PAGE的工作...

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Western Blot實驗步驟

本文摘要蛋白質印跡技術（免疫印跡實驗）又稱為WesternBlot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。WesternBlot主要用于檢測或分析蛋白，應用領域集中在基因表達研究、抗體活性檢測和疾病診斷等。01蛋白質印跡基本流程圖02westernblot步驟樣品準備：Tanon連續(xù)梯度預制膠（4-20%10孔/15孔/17孔）；（4-12%10孔/15孔/17孔）TanonMops/MES電泳緩沖液（粉劑）Tanon預染蛋白MarkerTanon4×LD...

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熒光定量PCR實驗中CT值出現(xiàn)異常的原因分析

熒光定量PCR是生物醫(yī)學中常用的檢測核酸病毒的方法之一，由此，這幾年PCR儀也成了近幾年臨床檢測和分子生物學研究的主要實驗室設備。我們知道CT值是PCR擴增曲線中的重要參數(shù)，那么CT值是什么？它與PCR擴增存在什么關系？為什么有的時候基因擴增實驗中會出現(xiàn)CT值異常甚至缺少CT值的情況？什么是CT值？在熒光定量PCR擴增實驗中，當擴增產物的熒光信號（Fluorescencesignal）達到設定的熒光閾值（FLUORESCENCEthreshold）時的所對應的擴增循環(huán)數(shù)（Cy...

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細胞培養(yǎng)中常見的問題解答

標簽：細胞細胞培養(yǎng)液氮培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)是生命科學實驗中的基礎實驗，在細胞生長過程中，很多因素都會造成細胞生長不良。下面簡單歸納一下細胞生長不良的原因及對應的解決方案。常見問題一：為什么細胞解凍后缺少活力，活細胞占比較低？這種現(xiàn)象可能主要由以下幾種原因所導致：1.培養(yǎng)物凍存液等質量欠缺。解決方案：a.確保用來制備儲存物（凍存液）的起始培養(yǎng)物需要保證其健康、無微生物污染、處于生長對數(shù)期后期狀態(tài)。b.收獲細胞時需要小心翼翼，避免細胞損傷。2.儲存物凍存方法不當解決方案：a.在液氮冷凍...

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真空離心濃縮儀的原理和應用

溶劑去除是制藥、化學和生物技術行業(yè)廣泛應用中的過程。盡管使用了多種樣品形式和溶劑，但沒有一種單一的溶劑去除技術可以提供通用的解決方案。隨著冷凍干燥和離心濃縮技術的不斷成熟，結合真空泵、冷阱和加熱蒸發(fā)設備，所開發(fā)的新一代高功率冷阱、真空離心濃縮儀等儀器，既提高了蒸發(fā)性能又改善了樣品完整度，這類儀器還進一步地提升了溶劑回收率，從而減少了蒸發(fā)-濃縮過程對環(huán)境的影響。只有充分了解離心濃縮儀的基本原理與應用才能更好地在實驗中發(fā)揮它的作用。溶劑去除的原理在溶劑去除過程中，以熱量的形式施加...

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